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基本信息

項目名稱:
葉用芥菜 (Brassica juncea)和白菜型油菜 (B. rapa)之間體細胞雜交體的RAP
小類:
生命科學
簡介:
人工的細胞融合開始于20世紀50年代,60年代到70年代作為一門新興的技術發展非常快,應用范圍也極為廣泛。細胞融合技術作為細胞工程的核心基礎技術之一,已在農業、醫藥、環保等領域取得了開創性的研究成果,而且應用領域不斷擴大。
詳細介紹:
隨機擴增多態性DNA (Random Amplified Polymorphism DNA- RAPD)是1990年由Wiliam和Welsh等人[3]利用PCR技術發展的檢測DNA多態性的方法。RAPD分子標記建立在PCR基礎之上,通過使用一系列具有10個堿基的單鏈隨機引物,對基因組的全部DNA進行PCR擴增以檢測多態性。RAPD的重復性是限制其應用的主要因素,影響其重復性的因素很多,如模板濃度及純度、Taq酶、dNTP濃度、引物濃度、Mg2+的用量等。但是RAPD技術因其操作簡便、反應迅速、成本低、通用性好、靈敏度高且不需預先了解基因組的相關分子和DNA用量少等優點而被廣泛應用于藥用植物種內或種間親緣關系、種質資源分析、生物種群劃分、基因定位、遺傳圖譜構建和遺傳多樣性方面的研究。

作品專業信息

撰寫目的和基本思路

目的:檢測葉用芥菜和野生型白菜型油菜雜交體的基因組,鑒定雜交體植株。 基本思路:利用隨機擴增多態性DNA(RAPD)技術篩選出最適引物,進而對雜交體擴增的基因組分析,鑒定雜交植株。

科學性、先進性及獨特之處

隨機擴增多態性DNA(RAPD)是1990年由Wiliam和Welsh等人利用PCR技術發展的檢測DNA多態性的方法,本實驗利用RAPD技術對葉用芥菜和野生型白菜型油菜的細胞雜交體的基因組檢測。

應用價值和現實意義

培育融合親本優良性狀的雜合體,并利用分子標記技術檢測其基因組,判斷雜交體是否含有親本的特異性基因,減輕雜交后代的篩選工作進而建立對雜交體的培育方向。

學術論文摘要

以葉用芥菜(Brassica juncea)、野生型白菜型油菜(B.rapa)及其體細胞雜交體為材料,用隨機擴增多態性DNA (RAPD)技術進行基因組DNA多態性分析,共選用30個Operon10 bp隨機引物擴增出DNA片段。通過PCR-RAPD擴增選出了3個(OPA4,OPA8,OPB8)適合鑒定體細胞雜交體的引物。這些引物擴增的雜交體條帶中都有葉用芥菜和白菜型油菜的特征帶,在少數雜交體中出現新增條帶,表明這些植株均可能為體細胞雜交體。

獲獎情況

鑒定結果

參考文獻

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